抗球蛋白介质交叉配血试验
IgG 类血型抗体与红细胞膜上相应抗原结合即致敏红细胞,但不能交联而凝集相应的红细胞。
抗人球蛋白试剂的主要成分是马或兔抗人球蛋白抗体,这种抗体(二抗)可以结合致敏在红细胞膜上的IgG类血型抗体(一抗)的Fc 段,经抗人球蛋白抗体的“搭桥”作用,使已经致敏的红细胞发生肉眼可见的凝集。
抗球蛋白介质交叉配血试验步骤
1、生理盐水洗涤供、受血者红细胞3次,配成3%红细胞悬液。
2、取3人份O型红细胞并混合,经生理盐水洗涤后取压积红细胞1滴,加入IgG类抗-D血清2滴,置37℃水浴1小时后取出,以生理盐水洗涤3次后,离心去上清液,再用生理盐水配制成3%阳性对照细胞。
3、取2支洁净小试管,分别标记主侧和次侧。主侧管加入受血者血清2滴和供血者红细胞悬液1滴,次侧管加入供血者血清2滴和受血者红细胞1滴。
4、各试管经轻轻混匀后,置37℃水浴30分钟,分别取出后用生理盐水洗涤红细胞3次,倾去上清液。
5、各试管内加抗人球蛋白试剂1滴,1000×g离心15秒后,取出试管并轻轻摇动,肉眼观察试验结果并记录。
6、在阴性反应管内加入3%阳性对照细胞1滴,1000×g离心15秒后,取出试管并轻轻摇动,肉眼观察应出现红细胞凝集,否则提示抗人球蛋白试剂失效。(质控)